感染了慢病毒(Lentivirus,LV)后分选出来培养的细胞中,在后续传代培养过程中新长出来的细胞会有不带荧光的情况吗?如果会有这种情况怎么继续维持阳性率呢?

感染了慢病毒(Lentivirus,LV)后分选出来培养的细胞中,在后续传代培养过程中新长出来的细胞会有不带荧光的情况吗?如果会有这种情况怎么继续维持阳性率呢?

By 落落 at 2024-04-19
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感染了慢病毒(Lentivirus,LV)后分选出来培养的细胞中,在后续传代培养过程中新长出来的细胞会有不带荧光的情况吗?如果会有这种情况怎么继续维持阳性率呢?

1 个回复 | 最后更新于 2024-04-19
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2024-04-19
#1

会有荧光丢失的细胞,一般只有整合到了宿主细胞染色体上的才不会丢失,但慢病毒整合也有一定的概率,所以也存在那种只是借助了宿主细胞转录翻译系统表达但没有整合的,这类细胞荧光可能就会逐渐丢失,一般如果携带了抗性基因的话在后续的培养过程中可以加入一定浓度的药物维持阳性细胞率;如果只带了荧光,后续通过荧光进行定期分选,维持阳性率,或者可以等阳性细胞比例下降到不适宜实验的范围再次做流式分选。


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