可以先查阅文献，有没有报道过敲除致死或者成功构建敲除株的案例，如果没有相关报道，建议先进行预实验，在cell pool阶段检测敲除效果是否逐渐减弱，进一步筛选单克隆时，鉴定不到两个等位基因都发生移码的单克隆，说明目的基因可能存在敲除致死或影响细胞生长。