3*Flag有24个氨基酸，分子量在3kDa左右，一般空载体上3*Flag之前不会特意加上ATG，是不表达的；就算特意加上ATG了，一是形成的蛋白太短可能会被细胞识别而被降解掉；二是就算没被降解，跑WB的时候会因为只有3kDa而跑出去看不到条带，所以表达3*Flag作为对照意义不大。