与质粒转染或病毒感染的方式比较,Cas9 RNP体系有哪些优缺点?
与质粒转染或病毒感染的方式比较,Cas9 RNP体系有哪些优缺点?
By 云梦
at 2024-08-05
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1 个回复 | 最后更新于 2024-08-05
缺点:不同于质粒转染或病毒感染方式,会导致Cas9蛋白在细胞内持续表达。RNP复合物转导入细胞后,Cas9蛋白在一定时间内即会降解,在一定程度上可以降低脱靶效应。
优点:操作简便快捷,在体外将Cas9蛋白和gRNA或crRNA+tracrRNA混合,转导细胞后即可进行基因编辑,由于不需要转录、翻译的过程,RNP体系可以实现即时快速的基因编辑。另外,RNP方式避免了外源基因插入的风险,不容易引起机体的免疫反应,并且,相对mRNA,Cas9蛋白更加稳定,形成的RNP复合物可以提高gRNA或crRNA+tracrRNA的稳定性。