RNA甲基化修饰指发生在RNA分子上不同位置的甲基化修饰现象，常见的

荧光泛素化细胞周期指示物（Fluorescent Ubiquitinationbased Cell Cycle Indicator,简称FUCCI)是将两个细胞周期调节因子Cdt1和Geminin

第六代GCaMP蛋白（GCaMP6）有三种不同亚型：GCaMP6s、GCaMP6m、GCaMP6f

钙离子成像技术（Calcium imaging）是指利用钙离子指示剂监测组织内钙离子浓度的方法，常用于神经系统的研究，指示神经元内钙离子的变化，提示神经元活动。目前常用的基因编码钙离子指示剂是将来自于绿色荧光蛋白（

靶向肌肉分为2种注射方式，原位注射和系统性注射。原位注射包括：肌肉注射、经静脉肢体灌注、冠状动脉内灌注、循环输送、心内膜注射；系统性注射包括腹腔注射和静脉注射。

克隆载体（cloning vector）是指具有克隆载体的基本元件（复制起始位点，抗性基因，多克隆位点等)，可以携带DNA片段或外源基因进入受体细胞并能够大量复制从而实现外源基因扩增的载体。表达载体（expression

CRISPR/Cas13系统是目前发现的唯一能够降解RNA的蛋白，相较于RNA干扰技术，Cas13介导的基因沉默具有更高的特异性和敲除效率。其作用机制与CRISPR/Cas9

有可能是冻存细胞的环节出现了问题：当细胞冷到零度以下时，细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶，冰晶的大小对细胞的影响是不同的，大冰晶容易造成细胞膜、细胞器的损伤和破裂，因此，会造成复苏出来的细胞存活率低、状态等与冻存前差异很大。我们在冻存细胞时需要有几点注意事项：

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动物体内生理环境比较复杂，需要提高siRNA在体内的稳定性、半衰期、靶向性、纯度、药活性以及降低毒性后才能用于体内实验，采用增强稳定性和透膜效率的化学修饰（如2’-oMe\Chol等）的siRNA可达到更好的效果。siRN

目前用于研究转录因子于靶基因启动子结合的实验有：chip-qPCR；双荧光素酶实验；酵母单杂交点对点验证；凝胶阻滞实验EMSA。

Cas9的核酸酶剪切活性取决于两个结构域：RuvC和HNH，它们分别负责切割DNA链的两条链，将这两个保守的核酸内切酶结构域进行突变，其中RuvC催化结构域的第

设计高效编辑的gRNA序列是cas9-gRNA敲除实验的关键，通常需要满足以下设计原则：

  1）靶位点应设计在外显子上，在基因上

双分子荧光互补（Bimolecular fluorescence complementation, BiFC），该技术是利用荧光蛋白的特点来研究蛋白的相互作用。荧光蛋白可从特定的位点被分开，产生两个非荧光活性片段。当两片段分别被融合到相互作用的蛋白上时，会因蛋白的相互作用力而被拉近、发生互补从而重新构建成有活性的荧光蛋白并在激发光下产生荧光。因此利用荧光显微镜就可以直接通过观察

常用的载体可以按照属性、进入受体细胞的类型以及功能进行分类：

① 按照属性分为病毒载体和非病毒载体