在保证慢病毒感染效率的条件下，可能存在以下原因：

（1）细胞目的基因内源表达水平太低，很难通过敲减手段使其表达更低，可通过 qPCR 检测本底表达，选择高表达的细胞系；

（2）目的基因与细胞生长增殖等相关性较高，敲减会影响细胞状态、生长、增殖等，细胞自身调控作用会抑制目的基因的敲减效果；

（3）体内敲减在取材时无法保证只取特异性组织或细胞进行干扰检测，可用原位杂交或是免疫荧光等方式检测；

（4）目的抗体灵敏度或特异性不够，可尝试用 qPCR 的方法检测。