实验中慢病毒感染效率不高的情况要怎么解决？

干扰慢病毒感染后，为什么目的抗体检测不到干扰效果？

不同种属间的基因过表达与干扰是否可以通用？比如在人的细胞里面过表达小鼠的基因

过表达蛋白时，加蛋白标签（tag）的目的是什么？

 circRNA 的过表达是如何实现的?

AAV为什么不适合作为载体做体内敲除？

为什么Cas9 慢病毒滴度不高？主要原因是什么？

GFP、EGFP

典型的海绵结构包含 3 到

难检测出，因为 miRNA 干扰的原理是结合抑制并不是降解 mi

① pri-miRNA 长度从几百到几千个碱基不等，长度略长，不是最佳选择。

②

过表达pre-miRNA前体后，前体会从细胞核核孔进入到细胞质，在细胞质中会自动被酶切为成熟体，这一步和

当一个基因存在多个转录本时，应当如何选择转录本进行基因过表达实验？

一个基因为什么会存在多个转录本，可能的原因是什么？

lncRNA的敲低有哪些策略？

lncRNA的敲除有哪些策略？

细胞永生化最为常见的策略主要有三种：

（1）过表达病毒的基因，常见的病毒致癌基因包括：腺病毒的E1A/E1B

腺相关病毒（AAV）感染不会导致细胞病变效应，因此，空斑实验不能用于确定其感染滴度，而

回复#1 @减肥呀减肥呀 :

IU：感染单位（infectious unit），和

这些不同的滴度单位源于不同的滴度测定方法，这些方法包括2类：物理方法（VP）和生物学方法（

不可以，腺病毒缺失E1A基因，该基因与病毒复制相关，293A细胞是反向表达

不同种属间的基因过表达和干扰病毒是否可以通用？

如果我想做融合蛋白，需要怎么连接两个蛋白不让两个蛋白互不干扰？

敲除单克隆株是不是直接通过抗性筛选就可以了？

我想敲除一个细胞系的基因，常见的方法，工具有哪些？

因为前面的几十个碱基是无法识别的杂峰，最后几百个碱基也是无法识别的杂峰，我们无法知道这部分序列的真实数据。将目的片段放到载体上，使用载体引物（距插入基因100bp左右）测序，可获得完整准确的基因序列。此外，

优点：

1.简单易行：TA

因为TA克隆简单成功率高，大多数的Taq酶都会在

TA克隆技术（TA cloning）利用Taq

为什么我做的实验和文献的情况不一样，荧光蛋白的亮度很低