我做慢病毒(lentivirus,LV)包装,但是包装过程293T细胞大量死亡是啥原因呀?
我做慢病毒(lentivirus,LV)包装,但是包装过程293T细胞大量死亡是啥原因呀?
By 橘子
at 2024-07-18
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我做慢病毒(lentivirus,LV)包装,但是包装过程293T细胞大量死亡是啥原因呀?
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1 个回复 | 最后更新于 2024-07-18
根据我的经验有以下几个原因:
(1)细胞可能被污染了,若发现早可根据具体污染的类型加入抑制污染剂及时补救;
(2)载体在抽提过程中,未进行去内毒素处理,转染进细胞后,产生毒性,导致细胞死亡,建议重新用去内毒素试剂盒抽提质粒;
(3)在转染前,细胞汇合率过高,使得培养基中营养物质耗尽,而代谢废物过多,从而导致细胞活性降低而死亡,建议如果不严重的话,在培养皿中补充新鲜培养基,若严重的话要重新铺细胞进行转染。