① pri-miRNA 长度从几百到几千个碱基不等，长度略长，不是最佳选择。

②从 pri-miRNA 到 mature miRNA，要经过两次酶切，效率不如从 pre-miRNA 到 mature miRNA，也增加了错误表达的可能性。从 pre-miRNA 到 mature miRNA 既模仿内源性表达又保证了效率和正确率。