我觉得可以考虑以下原因：
1.荧光易淬灭，注意避光。转染时室内和超净台内不开日光灯（FAM对避光要求更严格）；

2.转染操作要快，操作时间要短，操作完毕后，尽快将培养板放到培养箱。
3.sirna本身有荧光标记，可以在换液前后观察确定是荧光淬灭还是转染效率不够导致的。