进行目的序列测序的时候为什么不用PCR产物直接测序而是连到载体后转入大肠杆菌后进行测序?
进行目的序列测序的时候为什么不用PCR产物直接测序而是连到载体后转入大肠杆菌后进行测序?
By 小脑斧123
at 2024-02-29
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1 个回复 | 最后更新于 2024-02-29
因为前面的几十个碱基是无法识别的杂峰,最后几百个碱基也是无法识别的杂峰,我们无法知道这部分序列的真实数据。将目的片段放到载体上,使用载体引物(距插入基因100bp左右)测序,可获得完整准确的基因序列。此外,PCR产物易降解,而质粒稳定也是通常选择TA克隆测序的原因之一。