需要观察动物活体成像,AAV选择带荧光蛋白基因好还是荧光素酶基因好?

需要观察动物活体成像,AAV选择带荧光蛋白基因好还是荧光素酶基因好?

By 梧桐树下 at 2023-12-01
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1 个回复 | 最后更新于 2023-12-01
云梦
2023-12-01
#1

就荧光蛋白和荧光素酶比较而言,荧光素酶更适合用于活体成像观察,它的荧光穿透力更强,由其底物催化发光(即生物发光),因此观察到的背景低、效果好,且底物对动物的生理状态几乎没有影响;而荧光蛋白需要特定波长的激发光激发出荧光,有趣的是动物体的毛发等组织也会因此表现出荧光,导致出现背景影响观察;通过对观测部位剃毛,可减少背景。

另一方面,根据后续实验需求选择,如果需要切片或分离细胞观察荧光,则选荧光蛋白。其中绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白都是比较常用的,为兼顾活体成像我们更推荐使用红色荧光蛋白,红色荧光或近红外荧光的波长较长,荧光穿透更好,更利于活体成像观察。

还有一点关于检测方面的,荧光素酶属于底物催化的生物发光,做活体成像检测时无需设置激发光,如果观察过程中出现背景荧光可考虑下是不是这里设置有误。


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