现在很少用了，一般不是太必要可以不做。它的目的是作为阴性对照，即使自噬存在的情况下突变型的LC3也不会形成荧光斑点；如果LC3突变组出现荧光斑点，说明实验组的LC3可能存在非特异性聚集（LC3蛋白自身的聚集，而不是在自噬小体上聚集）。