siRNA下调效果很好,但是包装成shRNA病毒后,下调效果变差?
siRNA下调效果很好,但是包装成shRNA病毒后,下调效果变差?
By 小脑斧123
at 2023-11-01
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1 个回复 | 最后更新于 2023-11-01
siRNA和shRNA在结构上是不一样的,siRNA为化学合成,使用浓度一般为5μM,浓度较高,
瞬时转染时如细胞转染效率尚可,瞬时进入细胞中的分子数超过108,且不需要经过剪切加工就 可和靶点结合,干扰效率高。
shRNA则是将干扰基因克隆到DNA上,经过病毒整合(慢病毒)或非整合(腺病毒,腺相
关病毒)进入到细胞后,转录形成发夹RNA,再经过一系列酶的剪切加工,才形成可以和靶点结 合的干扰RNA。这个过程中因为拷贝数低(如慢病毒需要整合基因组),转录加工过程复杂,会 导致干扰效果不理想。