可以用无缝克隆试剂盒来做，不过拼接效率会随着拼接片段的数量增加或者拼接片段长度的增加逐渐降低，方便的话也可以先把2个目的片段之间先通过overlap PCR连接起来，再与线性化的载体片段进行无缝克隆。