我做慢病毒包装的时候,包装质粒转染时荧光很亮,但是包装成病毒并感染目的细胞后,荧光很弱,这种是什么原因,是不是表示目的基因表达效率也不高?
我做慢病毒包装的时候,包装质粒转染时荧光很亮,但是包装成病毒并感染目的细胞后,荧光很弱,这种是什么原因,是不是表示目的基因表达效率也不高?
By 下一班
at 2023-08-31
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1 个回复 | 最后更新于 2023-08-31
可能原因比较多:1.病毒包装不成功;2.滴度不够,可能病毒尚未从细胞中释放出来,可以试着将细胞裂解一下然后收集病毒;3.调整MOI根据细胞类型适合调整加入的病毒量等
荧光只是观察病毒感染效果的一个辅助方式,荧光强弱不代表目的基因的表达量高低,基因表达水平需要通过基因表达水平需要通过qPCR或者WB来鉴定。