T2A连接的话，前面的基因A不需要加终止密码子；IRES连接的话，前面的基因A需要加终止密码子。
T2A连接是会先翻译好一条蛋白链，之后在2A肽的位置断裂开来，既然是一条蛋白链，那肯定是不能有终止密码子的，所以要去掉基因A的终止密码子加上 2A 肽序列再加上基因B即可。
IRES是核糖体进入位点，作为额外的核糖体募集位点起作用，允许翻译起始发生在除了翻译起始位点之外的 mRNA 内部区域。IRES连接的话转录的是一条mRNA ，但是翻译的时候由于IRES位点引入核糖体，两个基因分别有自己的起始密码子和终止密码子，可以同时翻译成为两个独立的、无修饰的蛋白，所以基因A是需要有终止密码子的。