dCas9区别于Cas9的功能是什么?

dCas9区别于Cas9的功能是什么?

By lemons at 2023-08-28
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1 个回复 | 最后更新于 2023-08-29
减肥呀减肥呀
2023-08-29
#1

Cas9的核酸酶剪切活性取决于两个结构域:RuvCHNH。这两个结构域分别负责切割DNA 链的两条链,并且这两个结构域能够单独地被人工点突变失活。两种突变体的Cas9仍然具有核酸酶活性,可对靶向序列进行剪切作用。RuvCHNH同时处于失活状态时Cas9将不具有核酸酶活性,成为dCas9(dead Cas9)dCas9虽然没有剪切DNA的能力,但仍然可

以保留由gRNA引导进入基因组的能力。当转录激活子VP64dCas9融合后,能够促进靶向基因的表达;当转录抑制子KRABKox1结构域与dCas9融合后,能够抑制靶向基因的表达;当没有蛋白与dCas9融合,dCas9则会干扰靶向序列的转录过程。因此,若gRNA识别的基因位点在靶向基因的启动子附近,研究者将可以通过改变dCas9的结构,以实现对靶向基因表达的调控。



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