3FLGA 有多大啊,我一直不太明白空载体上带的 3FLGA 能不能表达?

3FLGA 有多大啊,我一直不太明白空载体上带的 3FLGA 能不能表达?

By 橘子 at 2023-05-17
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3FLGA 有多大我一直不太明白空载体上带的 3FLGA 能不能表达?


1 个回复 | 最后更新于 2023-05-19
减肥呀减肥呀
2023-05-19
#1

一个FLGA是8个氨基酸,3FLGA就是24个氨基酸;一个氨基酸的平均分子量是0.110 KDa,所以3FLGA大小是2.64KDa;举个例子,一个蛋白是53KDa(P53),加上 3FLGA 标签之后就是55-56KDa。用目的基因抗体检测的时候可能会看到两条带,本底的一条和外源表达的一条,但是很多时候两条带会在一起形成一条比较粗的条带;用 FLGA 抗体检测的时候,只能看到一条外源表达的条带。
空载体上的3FLGA一般是不能表达的,因为一般3FLGA之前不会再特意加上 ATG;就算特意加上ATG了,一是形成的蛋白太短了会被细胞识别而被降解掉;二是就算没被降解,跑WB的时候因为只有2.64KDa,也会因为跑出去而看不到。


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