敲入和敲除有什么不同

敲入和敲除有什么不同

By 减肥呀减肥呀 at 2023-05-09
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敲入和敲除有什么不同

1 个回复 | 最后更新于 2023-05-10
橘子
2023-05-10
#1

做内源点突变需要 Cas9 和 donor:如果是直接合成的 donor 序列的话,同源臂的序列一般为 100bp,如果是用质粒或病毒的方式的话需要更长的同源臂,一般会合成突变位点上下1000bp 的基因,共 2000bp。
Knock in 实验的成功,除了 donor 的选择,实验之前保证 sgRNA 的特异性,验证 sgRNA的切割活性对于 Knockin 实验的成功也非常重要。


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