干扰实验

干扰实验

By 落落 at 2023-05-08
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做干扰实验检测到目的基因的mRNA水平明显降低,但蛋白水平却没有检测到明显的变化,为什么会出现这种情况?

1 个回复 | 最后更新于 2023-05-08
梧桐树下
2023-05-08
#1

RNAi 是针对转录水平的调控,到蛋白多一步翻译,某些情况下不能保证完全与蛋白水平一致:

1)该蛋白的半衰期比较长,这个需要用测定半衰期的方法检测,具体是用一些蛋白合成抑制剂处理后,隔一定时间检测该蛋白的水平;

2)该蛋白有多种转录本,可能有不同 isoform 的蛋白,要确定下是不是 siRNA是针对所有的转录本;

3)另外最后的可能就是该基因的翻译效率较高,较少 mRNA 仍能维持较高的蛋白水平。


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