我的细胞能被病毒感染,检测有过表达效果,但为何GFP荧光很弱?

我的细胞能被病毒感染,检测有过表达效果,但为何GFP荧光很弱?

By summer at 2023-04-26
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1 个回复 | 最后更新于 2023-04-26
梧桐树下
2023-04-26
#1

GFP慢病毒感染细胞后,荧光强度取决于病毒进入到细胞的颗粒数、细胞本身的增殖状态、细胞类型、观察时间、GFP前的启动子活性等因素。

GFP基因荧光表达的强度与启动子的活性、目的细胞感染的病毒颗粒数呈正相关。慢病毒在增殖较快的细胞中感染48~72h(腺病毒则是36~48h),GFP蛋白表达才达到峰值;在增殖较慢的细胞中,GFP蛋白表达到达峰值需更久。GFP基因接在强启动子后面时荧光表达较强,弱启动子则荧光表达较弱。

观察荧光时最好关掉室内灯光,只留荧光显微镜光源。


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