进行细胞转染后如何验证转染效率?

进行细胞转染后如何验证转染效率?

By biothinker001 at 2023-04-07
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1 个回复 | 最后更新于 2023-04-07
小脑斧123
2023-04-07
#1

一般在转染24-72h之间可以进行转染效率的观察验证。

最简单直接的方法是通过荧光观察。一般可以通过质粒载体上的荧光蛋白基因,或者小干扰RNA带的荧光基团,来通过荧光显微镜观察细胞荧光比例来判断转染的效率。如果质粒不带荧光蛋白基因,也可以通过qpcr或wb检测目的基因的方式进行验证。

如果质粒载体上面没有带荧光基因,而是带有比如puromycin等抗性基因,也可以通过向培养基加入puromycin抗生素,将未成功转染进质粒载体的细胞杀死,加入puromycin抗生素后1-4天内,通过观察剩下转染成功的细胞的数量占比来大致判断转染效率。



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