细胞转染时是否需要使用无血清、双抗的培养基?

细胞转染时是否需要使用无血清、双抗的培养基?

By biothinker001 at 2023-04-07
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1 个回复 | 最后更新于 2023-04-07
小脑斧123
2023-04-07
#1

血清一度曾被认为会降低转染效率,在开始准备DNA和阳离子脂质体试剂稀释液时要使用无血清的培养基。血清中含有大量的蛋白质,在转染过程中,带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体/阳离子聚合物对核酸的吸附,影响转染效率。但在复合物形成后,在加入细胞中前可以加入血清。当然,最好是按照转染试剂说明书的要求来进行操作。

双抗一般对于真核细胞无毒,但阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性,使双抗可以进入细胞。这降低了细胞的活性,导致转染效率低。所以,在转染培养基中不能使用双抗,甚至在准备转染前进行细胞铺板时也要避免使用双抗。



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