细胞转染前核酸如何准备 ?

细胞转染前核酸如何准备 ?

By biothinker001 at 2023-04-07
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1 个回复 | 最后更新于 2023-04-07
小脑斧123
2023-04-07
#1

外源核酸的质量直接影响到转染效率从而影响到实验结果。

一般来说,用于转染级别的质粒一定要高纯度、高浓度、且无内毒素。浓度要求不低于500ng/ul,1000 ng/ul为宜,OD260/280>1.8。

OD260/OD280<1.6,表明核酸中有蛋白质、酚等污染。这些污染物将会影响核酸-转染试剂复合物的形成,从而降低质粒的转染效率。另外质粒大部分是从大肠杆菌中提取出来的,会产生大量内毒素,内毒素会影响细胞状态甚至导致细胞死亡,所以建议使用去内毒素试剂盒进行质粒抽提。

SiRNA的使用浓度,针对不同细胞,优化与转染试剂用量比。



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