1、CRISPR-Cpf1与CRISPR-Cas9有何不同?

1、CRISPR-Cpf1与CRISPR-Cas9有何不同?

By biothinker001 at 2023-02-24
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1 个回复 | 最后更新于 2023-02-24
小脑斧123
2023-02-24
#1

CRISPR-Cpf1与先前的Cas9有一些区别,对研究和治疗具有重要意义。
首先,DNA切割酶Cas9以其天然形式与两个小RNA形成复合物,这两个小RNA都是切割活性所必需的。Cpf1系统更简单,因为它仅需要一个RNA。Cpf1酶也比标准SpCas9小,从而更易于传递到细胞和组织中。
其次,也是最重要的一点,Cpf1以不同于Cas9的方式切割DNA。当Cas9复合物切割DNA时,它会在同一位置切割两条链,留下“平末端”,这些末端通常在重新结合时会发生突变。使用Cpf1复合物时,两条链上的切割是错位的,在暴露的末端留下短的突出端。预期这将有助于精确插入,从而使研究人员可以更有效,更准确地整合DNA片段。
第三,Cpf1切割距离识别位点很远,这意味着即使目标基因在切割位点发生突变,它也可能仍会被重新切割,从而允许进行正确编辑的多种机会。
第四,Cpf1系统为选择目标站点提供了新的灵活性。与Cas9一样,Cpf1复合物必须首先连接到称为PAM的短序列,并且必须选择与天然PAM序列相邻的靶标。Cpf1复合体识别与Cas9不同的PAM序列。这可能是靶向疟疾寄生虫基因组甚至人类基因组的优势。


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