干扰为什么不能带flag,但是可以带zsgreen、puro?

干扰为什么不能带flag,但是可以带zsgreen、puro?

By 小脑斧123 at 2023-02-17
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1 个回复 | 最后更新于 2023-02-17
biothinker001
2023-02-17
#1

干扰用的是shRNA,是干扰目的基因RNA水平的表达,载体转染细胞后表达出RNA,然后行使功能。Flag8个氨基酸构成的短肽,氨基酸是蛋白质的基本单位,需要翻译,flag与目的蛋白一起翻译,可以看做是一个融合蛋白。所以两者不是一个层次的表达,一个是RNA水平,一个是蛋白水平的表达,RNA在体内表达后不翻译,自然也就表达不出来flag。而zsgreenpuro是蛋白基因,而且表达的时候使用独立的启动子启动表达,是一个不同于RNA表达的单独表达单元,两者在一个载体上表达,互不影响。



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