细胞状态不好有哪些原因,如何判断是黑胶虫污染还是支原体?
细胞状态不好有哪些原因,如何判断是黑胶虫污染还是支原体?
By 橘子
at 2023-02-14
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细胞状态不好有哪些原因,如何判断是黑胶虫污染还是支原体?
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1 个回复 | 最后更新于 2023-02-14
细胞碎片:镜下见黑色杂质,大小不均,换液后不见,可能是细胞状态不好(比如原代细胞传代次数过多,新复苏的细胞复苏操作过程不适,冻存条件对细胞损伤大,病毒感染MOI值过大,细胞损伤较重,培养基条件不适,血清比例需要调整等。)。
细菌污染:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。对培养环境消毒,加抗生素。
霉菌污染:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差。对培养环境消毒,加抗生素。
真菌污染:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。没办法拯救。
支原体:高倍镜下见小黑点,对PH值影响较大,细胞换液后很快培养基变黄,换液后有一定改善但是培养后继续增多,做pcr检测鉴定。
黑胶虫:高倍镜下见小黑点,做布朗运动,换液不会改善。