AAV 在细胞上的表达远比不上在动物体内的表达,为什么?
AAV 在细胞上的表达远比不上在动物体内的表达,为什么?
By lifangtang
at 2022-08-11
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AAV 在细胞上的表达远比不上在动物体内的表达,为什么?
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1 个回复 | 最后更新于 2022-08-11
AAV 载体在体外实验中用于转导培养细胞时,常发现其表达水平较低,而且有表达延迟现象。这是因为 AAV 基因组是单链的,它进入细胞以后,必须要有一个由单链变为双链的过程,然后其所携带的外源基因才能进行转录和翻译,在没有辅助病毒或其它辅助因子的情况下,这种 AAV 由单链 DNA 在细胞内复制形成双链 DNA 的过程是十分缓慢的,因此相对于其它双链 DNA 病毒载体如单纯疱疹病毒(HSV)和腺病毒(Ad),其表达明显延后。此外,AAV 对细胞毒性低,培养的细胞在加入 AAV 后,细胞分裂生长能力不受太大的影响,这样也对 AAV 载体有一种稀释作用,也导致其表观表达水平较低。而在体内应用时,注射部位的组织细胞通常没有显著增殖,不会出现 AAV载体被稀释的情况,而且在体内各种促进 AAV 载体所携带外源基因表达的各种因子相对丰富,故体内应用时,AAV 载体的表达水平比较高。