从公司购买了一个过表达质粒,转染后检测,mRNA可以上升一百多倍,但是蛋白总是没有变化,为什么?
从公司购买了一个过表达质粒,转染后检测,mRNA可以上升一百多倍,但是蛋白总是没有变化,为什么?
By 汉恒-杨燕
at 2016-08-02
0人收藏 • 12858人看过
从公司购买了一个过表达质粒,转染后检测,mRNA可以上升一百多倍,但是蛋白总是没有变化,为什么?
- 登录后方可回帖
1 个回复 | 最后更新于 2016-08-02
原因如下:首先必须确认的是你的质粒表达载体上的目的基因是没问题的,如果连接到载体后就突变了,那么只会导致原料的竞争;其次可能你的抗体只能检测内源性目标蛋白,质粒表达的那部分检测不到;如果想要看下是否转染成功,建议可以在目的蛋白基因前加个GFP基因或者其他标志蛋白,这样你就可以进一步了解下状况了,再换个载体