原因如下：首先必须确认的是你的质粒表达载体上的目的基因是没问题的，如果连接到载体后就突变了，那么只会导致原料的竞争；其次可能你的抗体只能检测内源性目标蛋白，质粒表达的那部分检测不到；如果想要看下是否转染成功，建议可以在目的蛋白基因前加个GFP基因或者其他标志蛋白，这样你就可以进一步了解下状况了,再换个载体