我们也出现过这种问题。楼主是不是测浓度的时候不准啊，可以考马斯亮蓝染一下。或者也可能是胶、转膜、孵抗体或者显影液加得不均匀？重新跑一下，加几个以前跑得齐的样品做参照看看哪里出问题了