dCas9系统的作用机制是什么？

Crispr/cas9是基因组调控技术中灵活性最强的系统之一，其中CRISPR II类系统是目前使用最为广泛的RNA指导核酸内切酶技术，该系统有两个主要的组分：引导RNA（guide RNA，gRNA）和核酸内切酶（Cas9）。将Cas9的核酸内切酶活性的位点进行突变，使Cas9失去核酸内切酶活性，失活的Cas9称为dead Cas9（dCas9），dCas9虽然失去了切割DNA的能力，但仍然可以在gRNA的引导下与特定的DNA序列结合。CRISPR/dCas9系统的作用机制主要分为三部分：① 人工设计合成的一小段特异性RNA序列（single guide RNA，sgRNA）与dCas9和转录调控因子形成的融合蛋白组成复合体；② 该复合体中的sgRNA的碱基互补配对序列与目标基因结合；③ dCas9-sgRNA复合物作为一个支架将一系列效应分子募集到特定的位置来激活基因转录或因空间位阻阻止RNA聚合酶与启动子结合及抑制转录延伸，从而发挥调节功能。