蛋白融合荧光蛋白应该注意那些？

需要考虑融合在 N 端或者 C 端，有的蛋白 N 端有信号肽（在蛋白转运后信号肽将被切除）、
N 端有甲硫氨酸切除，这类蛋白我们一般将标签构建在 C 端，或者构建在 N 端信号肽之后。
有的蛋白 C 端有折叠、活化时 C 端前肽被切除等，这类蛋白我们一般将标签构建在 N 端。
信号肽（signal peptide）：信号肽存在于靶向内质网的蛋白质中，最终蛋白可能是分泌型/
细胞外型/周质型/等，一般在 N 端。
前导肽（leader peptide），转运肽（transitpeptide）：前导肽一般引导蛋白穿膜，并且在后
来被剪切掉；转运肽将蛋白运送至线粒体，随后被剪切掉，一般在 N 端。
首位移除甲硫氨酸：蛋白质成熟时首位甲硫氨酸被切割掉，一般在 N 端。
前肽（propeptide）：在成熟或活化过程中被裂解的蛋白质的一部分，可能在 C 端也可能在
N 端，一般存在于各类需要活化的蛋白中
建议在构建时在目的基因和荧光蛋白中间添加连接肽 linker，部分融合荧光蛋白可能出现
融合后荧光极弱甚至没有荧光的情况，这可能是融合蛋白内部相互作用影响了荧光蛋白的正
确构象。