如果我用T2A或IRES连接2个基因进行过表达,比如 基因A—T2A/IRES—基因B,那么我前面的 基因A 需要加终止密码子吗?
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橘子
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2023-08-29 •
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如果我用T2A或IRES连接2个基因进行过表达,比如 基因A—T2A/IRES—基因B,那么我前面的 基因A 需要加终止密码子吗?
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最后更新于 2023-08-29
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T2A连接的话,前面的基因A不需要加终止密码子;IRES连接的话,前面的基因A需要加终止密码子。
T2A连接是会先翻译好一条蛋白链,之后在2A肽的位置断裂开来,既然是一条蛋白链,那肯定是不能有终止密码子的,所以要去掉基因A的终止密码子加上 2A 肽序列再加上基因B即可。
IRES是核糖体进入位点,作为额外的核糖体募集位点起作用,允许翻译起始发生在除了翻译起始位点之外的 mRNA 内部区域。IRES连接的话转录的是一条mRNA ,但是翻译的时候由于IRES位点引入核糖体,两个基因分别有自己的起始密码子和终止密码子,可以同时翻译成为两个独立的、无修饰的蛋白,所以基因A是需要有终止密码子的。