买的包装好的病毒 但是每个基因合成三条shRNA 请问怎么筛选那个转染效率最佳呢?
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汉恒-杨燕
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2015-03-30 •
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买的包装好的病毒 但是每个基因合成三条shRNA 请问怎么筛选那个转染效率最佳呢?
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最后更新于 2015-03-30
MR. 司
2015-03-30
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惯用流式和q-pcr,流式的话,其实目测就可以,有流式只是给个更准确的百分比出来,因为大家大多都是目测,理论上是先看转染率,再看干扰率,然后再去筛稳定株. 流式只要10000个细胞,应该一般24孔的一个孔也就够了吧, qPCR每个组只要24孔的一个孔就够了,你细胞密度低也就12孔的一个孔即可, 所以大家买病毒之前,一定要跟公司确认好,是否带抗性,是否带荧光,带不带3FLAG,带不带T2A这种结构
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