腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）感染肺部使用几型？

AAV1、AAV2、AAV6、AAV8和AAV9型对心脏有较好的感染效率，其中AAV8和AAV9的感染效率较优于其他血清型，AAV9是目前公认的高效特异性靶向心脏表达的病毒载体血清型。尽管AAV8的感染效果也不错，但是没有AAV9的扩散性好。临床上靶向心肌的AAV血清型一般为1，6和9型，其中AAV1和AAV6均可有效靶向心肌和骨骼肌细胞，而AAV9则更加倾向于对心肌的感染。

肾脏研究中常用的AAV载体有 AAV2、AAV6、AAV8 和AAV9，其中AAV9型更优。

您好，我想使用腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）实现小鼠器官的特异性表达，有什么办法吗？

在排除细菌及真菌污染后，细胞中的黑点通常为细胞碎片。导致细胞破碎的原因有很多，但在慢病毒感染后，细胞破碎通常有两个原因：一是慢病毒使用量过多，或细胞数量过少；二是支原体污染。轻度的支原体污染并不影响细胞的生长和增殖，但支原体易在病毒感染细胞后爆发，故会出现大量细胞碎片。我们建议在使用病毒制品时，应首先排除细胞、培养物及培养环境中的支原体污染。

腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）在动物体内的表达量比体外细胞高的原因？

目的细胞中蛋白的表达与病毒感染细胞的颗粒数、细胞本身的增殖状态、GFP前启动子的强弱、细胞类型以及观察时间等直接相关。一般代谢较旺盛的细胞（如 293T）24小时后可以观察到荧光，代谢比较缓慢的细胞（如原代培养细胞，神经干细胞，胚胎干细胞等）蛋白表达所需时间较长，建议感染96小时甚至更长时间后观察荧光的表达。另外，感染期间，请根据细胞生长的情况及时换液，以保证细胞良好的生长状态。

求助AAV/Cas9载体动物敲除具体机制是什么？

过表达细胞系是基于某一细胞系构建的用于实现某特定基因的持续过表达。通过慢病毒法将过表达载体转入细胞中，根据预先摸索的最佳药筛浓度，对细胞进行药物筛选，直到对照组细胞全部死亡，获得基因过表达的稳定细胞株。

腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）感染肺部有什么方法？

siRNA是一种短双链RNA（21-25 nt），称为小干扰RNA（small interfering RNA / short interfering RNA，siRNA）。siRNA是由短发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA）为原料加工得来的，所以shRNA是siRNA的前体。siRNA能装载到RISC复合物（RNA-inducing silencing complex）上，并且结合到与其序列同源的靶mRNA上，使靶mRNA降解，为转录水平后调控。siRNA一般是人工体外合成的，3’端有两个碱基的悬垂，具有操作简便、转染效率高、对细胞或组织的毒副作用小、可大

用于腺病毒（adenovirus）包装的工具细胞是用293还是用293T呢？

这需要根据实验目的和慢病毒的特点来进行选择：如果感染的目的细胞是一些难转染的细胞（如原代细胞、干细胞、不分化的细胞）或者是对腺病毒感染具有较强免疫反应的细胞（如树突状细胞、单核细胞和间充质干细胞）时，可以选择慢病毒载体，能大大提高目的基因转导效率及整合至宿主基因组的几率。慢病毒宿主范围广，能感染分裂细胞和非分裂细胞，所以体内外研究中均可以选用慢病毒作为病毒载体。如果需要构建活体动物模型，尤其是动物成瘤实验，慢病毒是很好的选择。需要将外源基因整合到宿主染色体上，实现基因长期稳定表达时，或后续需构建稳转株，那慢病毒则是理想选择。慢病毒载体也可以改造T细胞用于CAR-T细胞治疗和基因治疗。慢病毒生产

为什么慢病毒（Lentivirus，LV）感染细胞效率很低？

病毒液一般怎么储存呢？如果长时间冻存会对病毒滴度产生影响吗？